Colorantes

Colorantes y su uso en tinciones citológicas 

Composición 

La molécula de colorante tiene dos componentes: uno que aporta color denominado cromógeno y otro que posibilita la unión a elementos del tejido, denominado auxocromo, según la naturaleza química del cromóforo hay varios tipos de colorantes para teñir células: nitrosos, ozoicos, derivados de la antroquinona, derivados de la acridina, derivados de iminas quinónicas, derivados de diferrilmetano y triferrilmetano, derivados del xanteno y derivados de las talocianinas.

Naturaleza química del radical auxocromo

Básicos 

Son sales en las que la base, normalmente una amina aporta el color, mientras que la partes ácida es incolora. Es decir son colorantes catiónicos, tienen apetencia por sustancias ácidas en el tejido como el ADN o ciertos componentes de la matriz extracelular como los glicosaminoglicanos, por ejemplo; tionina, safranina, azul de toluidina, azul de metileno o la hematoxilina.

Tinción con azul de metileno 

Ácidos 

Son sales con el anión coloreado y la base incolora. Son derivados de grupos sulfónicos, carboxilos o hidroxilos fenólicos. Tienen apetencia por sustancias básicas, sobre todo estructuras proteicas localizadas en el citoplasma celular y también por el colágeno de la matriz extracelular. La unión es por atracción eléctrica. Ejemplos de colorantes ácidos son la fucsina ácida, verde rápido, naranja G o la eosina.

Tinción con eosina

Mordientes 

Son aquellos que se usan en combinación con sales metálicas, que actúan como mordiente. Estas sales se pueden emplear junto con el colorante, antes o después. Normalmente se emplean para teñir los núcleos. Por ejemplo, la hematoxilina férrica de Heidenhain.

Tinción con hematoxilina férrica. 

Neutros 

Poseen una porción ácida y otra básica, ambas con capacidad para aportar color. Por tanto un mismo colorante puede teñir tanto las partes básicas como las ácidas de los tejidos. Por ejemplo, el eosinato de azul de metileno.

Tinción con eosinato de azul de metileno 

Indiferentes o hidrofóbicos  

Indiferentes o hidrofóbicos: realmente no se unen a elementos de los tejidos por afinidad química sino porque se disuelven en ellos. Por ejemplo, el colorante Sudán se disuelve en los lípidos y por tanto teñirá a las gotas de lípidos, especialmente en los adipocitos.                                                                                     

Tinción con sudán

La manera en cómo se consigue una tinción adecuada se puede dividir en dos tipos: progresiva y regresiva. La tinción progresiva consiste en obtener una coloración adecuada controlando el tiempo de la sección en el colorante, de modo que a más tiempo más coloración. La tinción regresiva consiste en la eliminación lenta de colorante de una tinción que ha sido teñida en exceso.

En algunas ocasiones necesitamos resaltar elementos tisulares de manera específica y para ello usamos colorantes que tienen apetencia por dichas estructuras.

Cuando un colorante se une al tejido y aporta un color diferente al que tiene en solución se dice que ha ocurrido un fenómeno de metacromasia. Esto se debe a que las propiedades de absorción de la luz del colorante cambian al unirse a componentes celulares.